三种葛根总黄酮提取工艺的比较及优化

葛根文献资料

第1 O卷第 5期 20 08年 9月

辽宁农业职业技术学院学报J l lo io ig A c lu a o e e ol fL a n n ma utrl U g C

Vo . 0.No 5 11 . S p. o 8 e t2 o

三种葛根总黄酮提取工艺的比较及优化汤晓，朱建华’

(宁波职业技术学院华丰学院宁波 3 5 o ) 18 0

摘要：对葛根总黄酮的三种提取工艺进行了比较及优化。结果表明，乙醇回流提取的最佳工艺条件为乙醇浓度7%, 0料液比 1 l提取时间 1,:0, h提取温度 8℃,佳提取率为 6 .%。超声提取的最佳工艺条件为乙醇浓度 0最 28 7%, 0料液比 1 l提取时间 2 mi,:5, 0 n超声温度 6℃, 0最佳提取率为 5 .%。微波辅助提取的最佳工艺条件为乙醇 61浓度 6%, O料液比 12,:0微波处理时间 4 s 3次)中高火处理， 0(,最佳提取率为 8 .%。微波辅助提取的效果最好， 57具有快速、节能、提取率高等优点。

关键词：葛根；黄酮；乙醇回流提取；超声提取；微波辅助

中图分类号： 0 Q53

文献标识码： A

文章编号：6l 01 (08 O o0一 4 l7一 57 20 )5一 0l 0试剂均为国产分析纯。1 2实验方法 .1 2 1乙醇回流提取 . .

葛根是豆科植物葛的块根，要成分为黄酮主

类、芳香类、三萜类等，是我国传统的药食两用植物。其中的总黄酮具有抗氧化、菌、癌作用，够防抗抗能治骨质疏松，气管炎、心病及妇科疾病也有一定对冠疗效。已有研究证明葛根总黄酮的临床疗效优于银杏黄酮，因而深入研究葛根总黄酮成为功能食品、医药工业领域的热点问题。 葛根总黄酮的传统提取方法有水提法、回流醇法、醇渗漉法、浸渍法等，而微波辅助提取以及超声提取等则为新兴的提取工艺。由于醇渗漉法、浸渍

设计乙醇浓度、液比、取时间、料提提取温度的

四因素三水平正交试验，有 9组试验，共每一组平行测定三次，共计 2试验。因素水平设计见表 l 7次。表 l正交试验中的影响因素及水平 (乙醇回流提取 )

法的生产周期较长，溶剂用量也较大，因此，文对本生产周期较短的醇回流法、波辅

助法以及超声提微取法进行了优化及比较，以期为提高葛根资源的综合利用提供理论依据。1 2 2超声提取 .. l 2 2 1单因素试验条件优化 _..分另对超声时间、声温度、液比和乙醇浓度Ⅱ超料进行考察。超声提取前，用一定浓度乙醇预浸先1 1材料与仪器 .1 1 1材料 ..3 mi。 0 n

1材料与方法

12 2 2正交试验条件优化 .. .

野葛根，于浙江省宁波市北仑区九峰山风景产区，洗净后晾干，切片， 8 c于 0c下烘干，粉碎备用。1 1 2仪器 ..

以单因素试验结果为依据，计超声时间、声设超温度、液比、料乙醇浓度的四因素三水平正交试验，共有 9组试验，每一组平行测定三次，计 2共 7次试

72 5 N型紫外一见分光光度计 (海精密科学可上

仪器有限公司)美的家用微波炉，声清洗器 (,超宁

验。因素水平设计见表 2。超声提取前，用一定先浓度乙醇预浸 3 m n 0 i。表 2正交试验中的影响因素及水平(超声提取 )水 A B C D

波市鄞州甬兴实验仪器有限公司)数显恒温水浴，锅 (海申胜生物技术有限公司 )上。1 13 ..试剂

葛根素标准品 (京 T M中药研究所 )其余南 c,收稿日期：O 8一 9— 1 2 o o 0作者简介：晓 (9 l一)女，江宁波人，汤 18,浙硕士学位，主要研究方向为生化物质分离。

平超声时间( i)超声温度(C)料液比(/ )乙醇浓度 ( ) o g 1%

123微波辅助提取 ..

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第 1 0卷

12 3 1单因素试验条件优化 . ..

表 4正交实验结果及分析 (乙醇回流提取 ) 葛根黄酮A B C D

分别对微波强度、料液比、波辐射时间和乙醇微浓度进行考察。微波处理前，先用一定浓度乙醇预浸 3 mn 0 i。微波处理后，溶剂冷却再次进行微波待处理，共计 3次。12 3 2正交试验条件优化 .. .

乙 度 (%)

(/ 1 gm)

提问提 笔 度’喜 _() h (c) 0 ’一

以单因素试验结果为依据，设计乙醇浓度、料液比、微波辐射时间、波强度的四因素三水平正交

、微试验，共有 9组试验，一组平行测定三次，计 2 每共 7次试验。因素水平设计见表 3。微波处理前，用先一

定浓度乙醇预浸 3 m n 0 i。微波处理后，溶剂冷待3 94 6. 94 7 4 3. 9

却再次进行微波处理，共计 3次。表 3正交试验中的影响因素及水平 (波辅助提取 )微水 A B C,

4 .6 77 63 . 15 2 .4 82 2

41 6 8 .3 36 9 4 .9 2 93 8. 8l .5 25 6

4 . l 2 66 2 .8 9 58 3 . l 53ll.2 3 O7

2 77 6. 2 l 27 O. 6

l .5 62 9

D

平

乙醇浓度 ( )料液比 ( 2% 1/ )辐射 5 ( 8微 U度 R gm13 4时问6 7 s 9一强 3次 )波

由极差分析可知，四个影响因素在本体系中的影响强弱为：液比>提取温度>取时间>乙醇料提

∞∞∞

加∞∞踟

浓度。最终确定乙醇回流提取工艺条件的最佳优化组合为： 2 l l l即选择 7%的乙醇水溶液作 ABCD。 0为溶剂，液比为 l 1 ( m )提取时间为 l,料：0 1, h提取温度为 8℃。经实验后， 0乙醇回流提取所得葛根

l

l

l

l

l

l

1

l

l

∞{ ;}m

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12 4葛根总黄酮含量的测定 . .12 4 1标准曲线的制作 .. .

黄酮的最佳提取率为 6 .%。 282 2超声提取条件优化结果 . 2 2 1单因素试验结果 ..

准确称取葛根素对照品 5,于 2 mL容量 mg置 5瓶中，加入 9%乙醇溶解并稀释至刻度， 5摇匀，别分

2 21 1超声时间的选择 . ..超声时间分别为 1mi,O i,0 i,0 i, 0 n 2 mn 3 mn 4 mn超声温度 5℃,液比为 l l (/ 1, 0料：O g m )乙醇浓度为7%。实验结果如图 l示。 5所

精确吸取 0 1 02 0踟， 4 0踟， .,鲫， . ., ., .暑 ., .吾 6 07 08, 30 5}5 . 0}}09 . .,1 0于 l m O L容量瓶中，各加 9%乙醇 1并 5 . 0I m,再加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。另取 9%乙， 5醇 10 L置 lmL容量瓶中，

.m 0加蒸馏水至刻度，作空4 6 O 3 4 6 5 6 l

弱{; 3

白对照， 2 0波长处测定吸光度。以浓度为横坐在 5标，光度值为纵坐标，吸绘制标准曲线。 12 4 2葛根总黄酮提取率的测定 . . .精确吸取一定量的葛根提取液置于 l mL容量 0瓶中，加入 9%乙醇 10 L用蒸馏水稀释至刻度， 5 .m, 按上述操作方法， 2 0 m波长处测定吸光度，在 5n根

据标准曲线方程计算样品溶液中总黄酮的含量。葛根总黄酮的提取率按以下公式计算： 提取率/=(品中总黄酮含量×稀释倍数%样× 0— )/品重 ( )× 0 l 3 )样 g 10

目

l‘ _ J n J

图 1提取时间对提取效果的影响

由图 l见，可随着超声时问的延长，根黄酮的葛提取率显著增加，O i达到最大值。当时间进 3 m n时一

2结果与讨论2 1乙醇回流提取正交优化结果 .

步延长，取率反而下降，可能是由于长时间下提这质进一步溶出，从而降低了总黄酮的提取率。综合J述实验结果，择 3 mi二选 O n的超声提取时间为宜。

超声波对细胞的破碎作用，导致细胞内非黄酮类物

在前期实验中，已对乙醇回流提取的单因素试验作了考察。乙醇回流提取葛根总黄酮的正交试验结果如表 4所示。

2 2 1 2超声温度的选择 .. .超声温度分别为 4 ,0,0, 0I,声 0 5 6℃ 7 c超二

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