植株全磷测定方法

植株全磷测定方法

植株全磷的测定

1 主题内容与适用范围

本标准规定了植株全磷测定的硫酸-过氧化氢消煮，钒钼黄比色方法。

本标准适用于禾本科植株全磷的测定。

2 引用标准

GB/T 603-2002 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备

GB/T6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法

NY/T 298-1995 有机肥料全磷的测定

3 原理

物样品经硫酸-过氧化氢消煮使各种形态的磷转变成正磷酸。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸,其吸光度与磷浓度成正比,可在波长400～490nm处用吸光光度法测定。磷浓度较高时选用较长的波长,较低时选用较短波长。

4 试剂

所有试剂除注明者外，均为分析纯。分析用水应符合GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法三级水的规格。

4.1 硫酸（GB/T 625）。

4.2 30%过氧化氢（GB 6684）。

4.3 硝酸（GB/T 626）。

4.4 钒钼酸铵溶液

A液：称取25.0g钼酸铵（GB 657）溶于400mL水中；

B液：称取1.25g偏矾酸铵（HG 3-941）溶于300mL沸水中，冷却后加250mL硝酸（4.3），冷却。在搅拌下将A液缓缓注入B液中，用水稀释至1L，混匀，贮于棕色瓶中。

4.5 氢氧化钠（GB/T 629）:10%（m/V）溶液。

4.6 二硝基酚指示剂:0.2%（m/V）溶液

称取0.2g2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中。

4.7 磷标准溶液: 50mg/L

0.2195g(干燥的KH2PO4(分析纯)溶于水,加入5ml浓HNO3,转移到1000mL的容量瓶中，然后用水定容。

4.8硫酸：5%（V/V）溶液。

5 仪器、设备

通常实验室用仪器设备和

5.1 消煮管：50mL或100mL。

5.2 消煮炉或可调电炉：1000W。

5.3 弯颈小漏斗：￠2cm。

5.4 分光光度计。

5.5 分析天平：感量为0.1mg。

5.6 移液管：5，10mL。

5.7 容量瓶：50，100，1000mL。

植株全磷测定方法

6 试样的制备

取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至100g，粉碎，籽粒全部通过0. 25mm（秸秆通过0.5mm）孔径筛，装入样品瓶备用。

7 分析步骤

7.1试样溶液制备

称取试样0.5g，精确至0.001g，置于50ml消煮管（5.1）中（勿将样品粘附在瓶颈上）。先滴入少些水湿润样品，然后加8mL硫酸（4.1），轻轻摇匀并放置过夜。在管口放一弯颈小漏斗（5.3），在消煮炉上先250℃消煮（温度稳定后计时，时间约30min），待H2SO4分解冒出大量白烟后再升高温度至400℃，当溶液呈均匀的棕黑色时取下。（时间约3h），稍冷后加10滴H2O2（注1），摇匀，再加热至微沸（注2），消煮约5min，取下稍冷后，重复加H2O2 5-10滴，再消煮。如此重复3-5次，每次添加的H2O2的量应逐次减少，消煮到溶液呈无色或清亮后（应该为水的颜色），再加热约5-10min，以除尽剩余的H2O2。将消煮管取下，冷却。并用少量水冲洗弯颈漏斗，洗液流入消煮管。将消煮液无损的洗入100mL容量瓶中，用水定容，摇匀。过滤或放置澄清后供磷的测定。

7.2 空白溶液制备

除不加试样外，应用的试剂和操作步骤同7.1。

7.3 标准曲线绘制

吸取磷标准溶液（4.7）0，1.00，2.50，5.00，7.00，10.00，12.50，15.00mL分别置于8个50mL容量瓶中，加入与吸取试样溶液等体积的空白溶液，加水至30mL左右，加2滴二硝基酚指示剂（4.6），用氢氧化钠溶液（4.5）和硫酸（4.8）调节溶液呈微黄色，加10mL钒钼酸铵溶液（4.4）摇匀，用水定容。此溶液磷含量为0, 1.00, 2.50 , 5.00, 7.50, 10.00, 12.50，15.00 mg/L的标准溶液系列。在室温15℃以上条件下放置20min后（最长不超过4h），在分光光度计波长440nm处用1cm光径比色皿，以空白溶液调节仪器零点，进行比色，读取吸光度。根据磷浓度和吸光度绘制标准曲线或求出直线回归方程。

7.4 准确吸取定容,过滤或澄清后的消煮液10.00ml放入50ml容量瓶中，加水至30mL左右，与标准系列同条件显色、比色，读取吸光度。

8 结果计算

8.1 计算公式

全氮（P）含量以g/kg表示，按下式计算：

全磷(P)= c×V×D×10/m

式中:

C ——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度, mg/L；

V——显色液体积, 50ml；

D——分取倍数，定容体积/分取体积，100/10；

m——称取试样质量,g；

10——将单位mL换算为L的换算因数。

所得结果应保留小数点后三位

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9注意事项

9.1加H2O2时，要直接滴入瓶底溶液中，如果滴在瓶颈壁上，H2O2很快分解，失去氧化能力；也不要滴在小漏斗上，以免遗留的H2O2影响磷的比色测定。

9.2H2O2不宜加入过早，每次用量不可过多，加入后的消煮温度不要过高，只要保持消煮液微沸即可。

9.3一般室温下,温度对显色影响不大,但室温太低(如<15℃)时,需显色30min。