第5章 免疫血清学检验技术

第五章 免疫血清学 检验技术

第一节 凝集与沉淀反应 第二节 放射免疫测定技术

第三节 免疫荧光技术第四节 酶免疫测定 第五节 固相膜免疫测定

第一节 凝集与沉淀反应一、 凝集反应及其特点凝集反应： 细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等 颗粒性抗原，或可溶性抗原(或抗体)与 载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应 抗体(或抗原)发生特异性反应，在适当 电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。

凝集反应过程： 抗原抗体的特异性结合 出现肉眼可见的凝集现象 凝集反应特点： IgM的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后，常不出现凝集现象， 称不完全抗体 临床意义： 进行细菌的抗原分析、鉴定及分型，也 可应用已知细菌检查未知血清的抗体。

多 克 隆 抗 体肌红蛋白

上清液

单 克 隆 抗 体

肉眼可见的凝集现象

二、 直接凝集反应直接凝集反应(direct agglutination): 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解 质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。

(一)玻片凝集试验

+ 方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低

临床应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定

(二)试管凝集试验

方法评价： 临床应用： 半定量试验 肥达氏试验：伤寒副伤寒 简便、快速 外裴二氏试验：斑疹伤寒 敏感度低 Wright test:布鲁菌病 可有假阳性 交叉配血试验

三、 间接凝集反应间接凝集反应(indirect agglutination): 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体 表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电 解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 载体种类： RBC(醛化);聚苯乙烯胶乳颗粒(羧化); 金黄色葡萄球菌。

(一)间接凝集反应的类型

1、正向间接凝集试验

用抗原致敏载体--检测抗体

2、反向间接凝集试验

用抗体致敏载体----检测抗原

3、间接凝集抑制试验

用抗原致敏载体--检测抗原

4、协同凝集试验 coagglutination test:以金黄色葡萄球菌 菌体为反应的载体。人及多种哺乳动物(猪、 兔、豚鼠等)血清中IgG抗体的FC段与菌体 表面的A蛋白(SPA)非特异性结合后，IgG 的两个Fab段仍然暴露在菌体表面，保持着 结合抗原的活性和特异性。当与特异性抗原 相遇时，能出现特异的凝集现象。 SPA--(Fc)IgG(Fab)--Ab

SPA:staphylococcal protein A

(二)正向间接血凝试验

血凝试验强度

1/16 1/32

1/64 1/128 1/2561/512 1/1024 Pos. Neg.

Patient

8 6

7

5

2 1 1/2 1/4 1/8

3

4

正向间接血凝试验<2 32 32 128 512

648

Titer

4