响应面试验设计优化脱氢酶发酵培养基

响应面

2009年19(2)　　　　　　　　　　　　　　　　　生　物　技　术　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　73

弱,MIC都是0.20gΠml。

表1　不同浓度的天山堇菜生物碱滤纸片法抑制细菌实验结果

Table1　Theantibacterrialactivitiesofdifferentconcentrationsofalkaloids

fromViolatianshanicaMaxim.

实验菌种肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌类产碱假单胞菌奇异变型杆菌

对照

7.08.07.07.0

抑菌圈直径(mm)0.25gΠml0.5gΠml

8.39.57.78.5

11.512.09.19.8

1gΠml17.520.310.212.5

注:表格中数据均为3次重复的平均值。

表2　不同浓度的天山堇菜黄酮的抑制细菌实验结果

Table2　TheantibacterrialactivitiesofdifferentconcentrationsoffromViolatianshanicaMaxim.

葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌有一定的抑制作用,而本实验研究发现天山堇菜的提取物对克雷伯菌属的细菌、类产碱假单胞菌、奇异变型杆菌有一定的抑制作用。且首次研究了天山堇菜中的生物碱的抑菌作用。克雷伯菌属的细菌为临床感染常见的病原体之一,可引起多种疾病,其中尤以肺炎克雷伯杆菌感染最为常见,可引起典型的原发性肺炎以及伤口创面、呼吸道、泌尿道等部位的感染及其败血症,甚至引起严重的脑膜炎、腹膜炎等[7]病,或因长期住院、化疗、插管,,或长期大量使用],。所以对天山堇,也为可。

表　MIC　TheMICofViolatianshanicaMaxim.extract

实验菌种肺炎克雷伯菌

奇异变型杆菌

)

对照

7.57.0

0.Πml7.98.4

Π13.09.49.3

1.Π15.323.011.111.9

实验菌种肺炎克雷

伯菌臭鼻克雷伯菌类产碱假单胞菌奇异变型杆菌

黄酮抑菌圈直径(mm)生物碱抑菌圈直径(mm)

0.15gΠml0.175gΠml0.20gΠml0.25gΠml0.15gΠml0.175gΠml0.20gΠml0.25gΠml7.07.07.07.0

7.07.27.07.0

7.57.97.07.4

8.010.07.98.4

7.07.07.07.0

7.07.07.07.0

7.17.77.07.2

8.39.57.78.5

注:表格中数据均为3次重复的平均值。

表3　不同浓度的天山堇菜生物碱的抑制真菌实验结果Table3　Theanti-fungusactivitiesofdifferentconcentrationsofalkaloidsfrom

ViolatianshanicaMaxim.

实验菌种稻瘟病菌

意大利青霉黄瓜疫霉甜瓜枯萎病毒瓜类根腐病菌

0.25gΠml5.310.4000

抑制率(%)

0.50gΠml

9.416.5000

注:表格中数据均为3次重复的平均值,对照的抑菌圈直径为7mm。

1.00gΠml15.425.5000

天山堇菜提取物对植物真菌的抑菌效果很差,这种情况

的出现可能是天山堇菜提取物中的有效成分对细菌细胞壁的破坏作用大于植物真菌的细胞壁。

参考文献:

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药典标准 维吾尔药分册[Z].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1999.

[2]刘勇民.维吾尔药志(上册)[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版,

1999:35-37.

[3]周晓英,马秀敏,田数革.天山堇菜提取物抑菌特性的研究[J].中国民族民间医药杂志,2004(67):113-115.

[4]马秀敏,周晓英,张立.天山堇菜提取物的体外抗菌实验[J].时珍国医国药,2004,15(8):470-471.

[5]田树革,丁剑冰,周晓英.维药天山堇菜中化学成分分析及抑菌实验研究[J].中国民族医药杂志,2000,6(3):36-37.

[6]沈萍,范秀容,李广武.微生物学实验[M].3版.北京:高等教育出版社,1999:73-73.

[7]陈洁,欧超伟,林湛.肺炎克雷伯菌的耐药性分析[J].中国热带医学,2008,8(6):991-992.

[8]夏凌志,钟惠霞.51株克雷伯菌对常用抗菌药物敏感性分析[J].中国实验诊断学,2007,11(8):1119-1120.

[9]崔晓梅.338株臭鼻克雷伯菌引起婴幼儿腹泻及耐药性分析[J].中华临床医学研究杂志,2008,14(8):1212-1212.

注:表格中数据均为3次重复的平均值。表4　不同浓度的天山堇菜黄酮的抑制真菌实验结果

Table4　Theanti-funguslactivitiesofdifferentconcentrationsofflavanones

fromViolatianshanicaMaxim.

实验菌种稻瘟病菌意大利青霉黄瓜疫霉甜瓜枯萎病毒瓜类根腐病菌

0.25gΠml

05.3000

抑制率(%)

0.50gΠml

07.51.500

1.00gΠml

09.25.32.40

注:表格中数据均为3次重复的平均值。

3　讨论

据文献[3,4]报道天山堇菜提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色

响应面试验设计优化脱氢酶发酵培养基

李静文,路福平,别松涛,张业尼,张艺,刘瑞娟

(天津市工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457)

摘要:目的:对简单节杆菌TCCC11037发酵生产脱氢酶的培养基进行优化。方法:利用单因子试验筛选出最适碳源为葡萄糖,氮源为酵母膏。采用Plackett-Burman(P-B)方法筛选出对产酶有重要影响的因素,并采用响应面试验设计(RSM)对重要因素进行优化。结果:葡萄糖、酵母膏、KH2PO4的浓度是影响脱氢酶产生的重要因素。优化后的培养基组成为(%):葡萄糖1.21,酵母膏0.65,KH2PO40.24,玉米浆0.8;培养基初始pH值7.0,接种量5%,通气条件为装液量100mLΠ500mL。结论:优化后脱氢酶

μ(g 活力达到24.57molΠmin),得到了明显的提高。

关键词:简单节杆菌;脱氢酶;Plackett-Burman;优化;响应面

中图分类号:TQ464.8　　文献标识码:A　　文章编号:1004-311X(2009)02-0073-04

3

ApplicationofResponseSurfaceMethodologyinOptimizingthe

FermentionConditionsforProducingDehydrogenase

LIJing-wen,LUFu-ping,BIESong-tao,ZHANGYe-ni,ZHANGYi,LIURui-juan

3

响应面

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　生　物　技　术　　　　　　　　　　　　　　　　　2009年19(2)74

(TianjinKeyLaboratoryofIndustrialMicrobiology,CollegeofBiotechnology,TianjinUniversityofScience&Technology,Tianjin300457,China)

Abstract:Objective:OptimizethefermentionconditionsofdehydrogenasebyArthrobactersimplexTCCC11037.Method:Bysingle-factortest,theoptimumcarbonsourceandnitrogensourcewereconfirmedasglucoseandyeastextractrespectively.TheimportantfactorswereselectedbyPlackett-Burmanmethod,andresponsesurfaceanalysiswasusedtooptimizetheseimportantfactors.Result:Thedehydrogenaseactivitywasmainlyinfluencedbyconcentrationofglucose,yeastextractandKH2PO4.Theoptimalfermentionmediumcomponents(%)were:glucose1.21,yeastextract0.65,KH2PO40.24,cornsteepliquor0.08;theoptimumenzymeproducingconditionswere:initialpHofmedium7.0,inoculumvolume5%,liquidvolumeinflask100mLΠ500mL.Conclusion:Atoptimumconditions,thedehydrogenaseactivitywassignificantlyimprovedto

μ()24.57molΠg min.

Keywords:Arthrobactersimplex;dehydrogenase;Plackett-Burman;optimizing;responsesurface

β-甲基-9α-氟氢化泼尼　　倍他米松(Betamethasone)即16

β-methyl-9α-fluor-opredni-solone),是目前糖类皮质松(16

激素中作用最强的药物之一,其抗炎作用是氢化可的松的35倍,比强的松高10倍,是地塞米松的2.5倍[1]。影响糖 …… 此处隐藏：10922字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……