单克隆抗体研究进展

本文主要介绍了近几年单抗的研究进展

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单克隆抗体技术的研究进展 定义 单克隆抗体 (Monoclonal Antibody McAb) 单个B淋巴细胞克隆所产生的抗 体 特点 1.特异性强，具有抗原结合位点的特异性2.因结合位 点的单一性，有时不易捕捉抗原，一株单克隆抗体与抗原 不易产生凝集反应或沉淀反应3.抗体性质相同，容易纯化、 标记

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1 Ag 2 3

B1 4 B2 B3 B4 多克隆抗体 多克隆抗体

B3 B3

B3 B3 单克隆抗体

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制备单克隆抗体的基本原理： 制备单克隆抗体的基本原理：致敏的B淋巴细胞 致敏的 淋巴细胞(能够分泌特异性的抗体 ， 不能在体外长期生存 )

骨髓瘤细胞( 骨髓瘤细胞(myeloma) )(不能分泌特异性的抗体， 不能分泌特异性的抗体， 但能在体外长期生存 )

阳性杂交瘤细胞 (hybridoma)1 2 1 22 2 2

(既能分泌特异性抗体， 既能分泌特异性抗体，

克隆化培养

又能够在体外长期生存) 又能够在体外长期生存)

(产生单克隆的阳性杂交瘤细胞)

生产单克隆抗体

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单克隆抗体 制备过程动物细胞融合技术

获得产生相应抗体的 B淋巴细胞 淋巴细胞

B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 瘤

只有杂种细胞才能活

动物细胞培养

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研究进展 1.1 鼠源性单抗 自单克隆抗体制备技术问世以来，制备单抗的一般程 序基本相同，从超免疫的供体中即抗原免疫的小鼠，获取脾细胞，再 与骨髓瘤细胞融合，最后对单个细胞进行克隆，培养出能分泌单抗的 克隆细胞。目前生产的单抗大多是鼠源性的，但其在临床应用方面还 存在着很大的弊端，主要是鼠源单抗与NK 等免疫细胞表面Fc 段受体 亲和力弱,产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)作用较弱， 而且它与人补体成分结合能力低, 对肿瘤细胞的杀伤能力较弱，并且 鼠源性抗体在人血循环中的半衰期短，它发挥ADCC作用的时间较短； 其次鼠单克隆抗体还具有免疫原性，使宿主易引起过敏反应。这样一 方面降低了单抗的效价，另一方面又会给病人带来严重的后果。因此 鼠源性单克隆抗体还应进一步改善才能广泛应用于临床。 1.2 嵌合抗体 抗体的恒定区是抗体分子结构中免疫原性最强的部位， 而决定抗体特异性的是抗体的可变区。从杂交瘤细胞分离出功能性可 变区基因，与人Ig 恒定区的基因连接,再插入适当表达载体，转染宿 主细胞，表达人- 鼠嵌合抗体。也就是将鼠源性单抗在保留其抗原结 合活性的基础上，尽可能的去除鼠源化部分或代之以人源化片断，减 少了鼠源性抗体的免疫原性，从而尽可能的减少单抗的异源性，同时 保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力。但是这种抗体仍保留了30% 的鼠源性，可诱发人抗小鼠反应(HAMA)。

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1.3 人源化抗体 由

于嵌合抗体异源性仍然很大，因此需要对鼠源抗 体进行人源化改造，进一步人源化的方法很多, 主要是重构抗体和表 面重塑技术。重构抗体就是互补决定区(complementarity determining region, CDR)移植，将鼠抗体的CDR 移植到人抗体的相应部位，这样 人源化程度可达90%以上，目前该方法是人源化单抗最常用、最基本 的方法。而表面重塑技术，即将鼠抗体框架区表面氨基酸的残基 (surface amino acid residues, SAR)进行人源化改造。该方法是仅替换与人抗 体SAR 差别明显的区域，在维持抗体活性并兼顾减少异源性基础上 选用与人抗体表面残基相似的氨基酸替换。 1.4 人源性抗体 虽然人源化抗体解决了鼠抗体的免疫原性等问题， 但生产人源化抗体仍有很大的困难；人源化过程需大量繁复、昂贵的 电脑模拟，需取代不同的氨基酸以恢复选择性和亲和力，工作量非常 大，并且它总还含有少量鼠源性成分。完全的人源性抗体才是用于治 疗的理想抗体，目前它主要通过3 种途径来研制：噬菌体抗体库技术、 核糖体展示技术和转基因小鼠制备人源性抗体。

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1.5 杂交瘤技术的拓展 随着杂交瘤技术在生命学科各个领域中应用 的不断深入，杂交瘤技术生产单克隆抗体的方法得到了很多改进，人 们不断发现单克隆抗体的新用途。其它动物的杂交瘤技术由于人或动 物不同类间抗体有排斥反应，80 年代以来，人们在鼠杂交瘤技术的 基础上，发展了人源杂交瘤技术，鼠与其他动物包括兔、牛、猪和绵 羊的种间杂交瘤。其它动物源的杂交瘤分泌的单克隆抗体特别适合于 兽医和食品检验领域中使用。如80 年代中期用EB 病毒转化体外培养 的人B 淋巴细胞建立分泌单克隆抗体的细胞系获得成功，为人源单克 隆抗体的生产开辟了新的途径。抗体酶技术1986 年，Schultz 等和 Tramontano 等发现某些单克隆抗体具有酶的催化作用，从而为人工 设计和生产具有特定催化活性的抗体酶开辟了道路。目前已制备出具 有变位酶活性的抗体酶和水解羟基酯、羧基酯、碳酸酯和香豆素酯的 酯酶活性的多种抗体酶。 抗独特型抗体的单克隆抗体独特型是指存在 于抗体分子可变区及淋巴细胞受体上的抗原决定簇，由独特型抗体 (第一抗体)刺激机体产生的抗体(第二抗体)能识别抗原位点的独 特型抗体的抗原决定簇，由抗独特型抗体的抗体(第二抗体)刺激机 体产生的抗体(第三抗体)能与抗原结合，即与独特型抗体(第一抗 体)具有类似性。抗独特型抗体作为一种探针已广泛应用于受体结构 和功能的研究，还可用于鉴别和比较特异性抗体分子上的独特型抗体 决定簇。

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我国单克隆抗体药物研发进

展情况 我国单克隆抗体药物研发进展情况 克隆 近年来中国的单抗技术已经受到越来越多的关注和重视，单克隆抗体 药物研究已被列入863计划和国家重点攻关项目。目前，中国已有2个 治疗性单抗产品获准生产，3个治疗性产品处在临床试验阶段，多个 抗体药物处于临床前研究阶段，已批准的诊断性单抗有31个。武汉生 物制品研究所抗肾移植单抗OKT3(注射用鼠源性抗人T淋巴细胞CD3 抗原单克隆抗体)最早批准上市，具有免疫抑制作用，可逆转对移植 器官的排斥反应。东莞宏远逸士生物技术药业开发的生物制品国家一 类新药：粤宏远(0573)下属之东莞宏远逸士生物技术药业开发的生 物制品国家一类新药“恩博克乳膏”(抗人白细胞介素-8单克隆抗 体),用于银屑病(俗称牛皮癣),已于 2001年6月获准生产。上海 华晨治癌药业有限公司与美国南加大合作开发的碘人鼠嵌合型肿瘤细 胞核单克隆抗体注射液(131I-chTNT),用于多种实体瘤，该药物为 国家一类新药，目前已进入三期临床阶段。第四军医大学基础部的国 家一类新药碘[131I]肝癌单抗放免诊断剂和治疗剂，用于原发性肝 癌的体内定向诊断及体内导向治疗，也处于临床研究中。该抗体药物 的中试生产下游工艺经不断优化，通过使用SREAMLINE扩张柱床吸 附技术再配合疏水层析，取得了比传统工艺更为理想的结果

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北京百泰生物药业公司的人源化单克隆抗体药物H-R3也已经进入二期临 床，有望于2004年投产，该产品具有大批量发酵和规模生产的特点。 h-R3是继用于治疗结肠癌淋巴转移患者的PANOREX和用于治疗转移 性乳腺癌的HERCTPTIN之后，第三个面世的 …… 此处隐藏：1787字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……