碱性蛋白酶水解法制备玉米肽的研究

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吉林农业大学学报

20,6 2:4 14,4 04 2 ( ) 12 4 19

J u a inA rutrl n e i or lfJ i gi l a i rt n o l c u U v sy

碱性蛋白酶水解法制备玉米肽的研究。李艳丽 光，,陈 丛建民。孙吻刘艳秋， 歌， ,吴( .吉林农业大学生物技术学院，长春 10 1; .白城师范学院生物系，白城 17 0 ) 1 3 18 2 3 0 0摘要：利用碱性蛋白醇对玉米蛋白进行水解制备玉米肽，以水解度 ( H)征其反应程度，定了玉米肽的 D表确

最佳水解条件：温度为 5￣ p 5C,H值 85底物浓度 50,质量分数 40,解时间为 20h在此条件下， ., .%醇 .%水 .。 水解液的氮溶指数 ( S)水解度 ( H)别为 6 .%和 6 .0。 N I和 D分 28 7 24% 关键词：蛋白醇；玉米蛋白；玉米肽

中圈分类号： S 1 . T2 34

文献标识码： A

文章编号：10 -64 20 )20 4.3 0 058 (0 40 .120

S u y o e a ain o r e t e f m m r ti y t d n Pr p r t fCo n P p i r o d O Co P o en bAlal e Pr t a e Hy olss k i o e s dr y i nL nl IYa—i,C N Gu n ON in ri2,S N n I a . i HE a g,C G Ja . n a U Ya g,L U Y n qu,W U Ge

( . o g Bo cnl y inA rutrl nvrt 1 Cl e e f l o ieh o g,Jl gi ua i sy,C ag h n 10 1,C i t o i c l U e i h n cu 3 18 hn 2 Dp r et a; . eat n m f ioy,B i eg N ra o ee a hn 3 00,C i ) o Bo g l a hn om l lg,B i eg 17 0 h n c Cl c aAb ta t C m rti s h d lz d b l ak ln mta e t rd c o n p p i e.Ex e to￣l— s r c: o p oen wa y m y e y al l aie p e s o p o u e c r e td tn fll t Ct n wa x r se n tr fd ge f

h d oy i i s e p e s d i e ms o e r eo y r lss.T e o tmu h d y i gc n iin a eb e e e o h p i m y mlzn o d t sh v e n d tr o

mi e n d:tmp rt r s5 e e au e i 5℃,p v u s8. H a e i 5,s b tae c n e tain i 0%,e z me c n e ta o s l u srt o c n rto s5. n y o c n rt n i i

4.,a dh d zn mei 2. o m.I eec n i o s i o e ou it d x( S ) e re 0% n y myigt 0h u i s nt s o dt n,nt g nslblyi e N I粕d d ge h i r i n o y rls ( H) fh d yae ae rs et ey6 8% a d6 4 fh doy i D 0 y mlst r e p ci l 2.7 s v n 2.0% .Ke y wor s:p e e;c r rti d mta s o n p oen;c r e td o n p p ie

玉米蛋白粉是玉米加工淀粉过程中的主要副产物之一，蛋白质含量高达 6%以上。因其赖其 0氨酸和色氨酸含量低、溶性差…而限制了其在水食品中的应用，目前主要用于粗饲料的配制。研究发现，人类摄食的蛋白质更多的是以低肽形式吸收。对许多肽而言，不一定要求是由必需 J并氨基酸组成的，就为蛋白酶水解玉米蛋白质这制备玉米肽提供了理论依据。玉米蛋白质经蛋白酶水解可得玉米肽。玉米

性，降血压[]抗疲劳如 5、。仙、治疗肝昏迷¨、解除乙醇毒性…等，被广泛地应用于食品及医’可药领域。本研究利用碱性蛋白酶对玉米蛋白粉进行水解，定玉米肽的最佳酶解条件，确旨在为玉米

蛋白的转化、用及提高其附加值提供一条可行利的途径。

1材料与方法1.材料 1

肽具有许多良好的功能特性，高溶解性、浓如高度、黏度等。除此之外，具有许多生理活低还 基金项目：吉林省科技厅资助项目(02 2 1 200 1)

碱性蛋白酶购自北京美的生物技术有限公司；玉米蛋白粉由吉林吉发集团

黄龙淀粉厂提供，

作者简介：艳丽 (98)女，士，李 17 .,硕主要从事生物化学教学与生物工程研究工作。收稿日期： 0 30 . 2 0 -42 9

通讯作者

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第 2 6卷

第 2期

李艳丽等：性蛋白酶水解法制备玉米肽的研究碱

13 4

粉碎， 0 1 m(0目),用；甲酚绿，ev过 .8m 8筛备溴 Sra进口分装；氯乙酸、酸铜、酸钾、硫酸等试 三硫硫浓剂均为国产分析纯。1 2主要仪器 .

操作。按上述所确定的最佳温度、 H值，别在 p分底物浓度为 2、%、%、%、0、2的条件% 4 6 8 1% 1%下进行水解，他条件不变，解 10h以 D为其水 .。 H指标，定最佳底物浓度。确

恒温水浴振荡仪、密 p计、白质测定精 H蛋仪、心机、2离 7 2分光光度计等。1 3方法 .

( )酶质量分数的确定：品处理同“ . .” 4样 13 2项操作。按上述所确定的最佳温度、 H值、物 p底浓度，别在酶质量分数为 1、%、%、%、分% 2 3 45、%的条件下进行水解，他条件不变，解% 6其水

1 3 1测定指标及方法测定指标及方法为： .. ①酶活力的测定：林一酚法，照 G 5 7—8。福参 B4 0

10h以 D .。 H为指标，定最佳酶质量分数。确 1 3 4酶解条件的优化 ..依据单因素试验初步确定的酶解条件，择温度 (、 H值 ( )底物选 A) p B、浓度 ( )酶质量分数 (作为试验因子， D为 C、 D)以 H

②氮含量的测定：微量凯氏定氮法，参照G 50 . B 0 9 5—8。③水分含量的测定：压烘干法， 5常 参照 G 59—8。④水解度 ( H的测定：酶解 B4 5 5 o )取上清液 1 L加入 1 L的 1%三氯乙酸 ( C 0m, 0m 0 T A)溶液，合振荡 3 m n混 0 i,然后离心 3 mn 0 i

指标，采用 k(正交试验设计， 3)对碱性蛋白酶水解玉米蛋白制备玉米肽水解条件进行优化( 1。样品处理同“ . .”操作，解 10h 表 ) 132项水 .。衰 1试验方案T be

1.E p r n a d sg a l x e me t l e in i

( 0/ i)取上清液，白质总氮和上清液可 400rmn,蛋溶性氮由微量凯氏定氮法测得，用公式计算水利解度“。⑤氮溶指数 ( S )测定：一定量的 NI的取经40 0 r i离心的酶解上清液，上清液中可 0/ n m测溶性氮，然后计算氮溶指数¨ 。13 2玉米蛋白制备玉米肽的操作n .. 称取一

定量的玉米蛋白粉于三角瓶中，一定的比例加按

缓冲液，拌均匀。放入恒温水浴振荡仪中至所搅需温度，至所需的 p调 H值。加适量碱性蛋白酶， 开始水解。用 4m lL的 N O o/ a H维持 p H值恒定。 水解结束后，三角瓶放入 9℃水浴锅中，持把 0保 1 i,酶失活。取出三角瓶，速冷却，水 5m n使迅将解液离心 1 i( 0/ i )取上清液，录体 0m n 40 0 r n, m记积，并测定上清液的 N I和 D S值 H值。13 3玉米蛋白制备玉米肽条件的初步确定 .. 1 3 5水解时间的确定 ..样品处理同“ . .” 13 2项

操作。按正交试验所确定的最佳水解条件即温度、H值、物浓度、 p底酶质量分数，别测定玉米分蛋白水解 0 5 10 15 20 3 0 4 0 5 0 h时的 ., ., ., ., ., ., .

N I D确定最佳水解时间。 S和 H,

2结果与讨论2 1正交试验结果分析 .

利用单因素试验法对酶解玉米蛋白粉制备玉米肽的水解条件进行初步确定，试验方法如下。( )度的确定：品处理同“ . .”操作。 1温样 13 2项 按照 4,0 5,0 6℃水浴温度进行水解，他 5 5,5 6,5其条件不变。水解 10h以 D为指标，定最佳 .。 H确温度。

通过正交试验，定了碱性蛋白酶水解的最确

适温度、 H值、物浓度和酶质量分数，交试验 p底正结果见表 2。

通过极差分析，出各因素影响的主次关系得为 A>B>D>C最佳配比为 A B D c,试验得， 3。 3。而出的最佳配比 A B D c。两者进行追踪比较，,:,。得出 A BD C,:,。为最适

水解条件。即：适温度为最

( ) H的确定：品处理同“ . .”操作。 2p样 132项

按上述所确定的最佳水解温度，别在 p为分 H8 0 9 0 9 …… 此处隐藏：6208字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……